1.3.3挥发油成份GC-FID分析
用正己烷配制浓度为20 μL/mL挥发油溶液,用火焰离子化检测器(FID)安捷伦7890B气相色谱系统,以涂层为(5%苯基)-甲基聚硅氧烷的HP-5熔融石英毛细管柱(内径30 m×0.32 mm,膜厚0.25 μm)对挥发油样品进行分析。色谱条件:载气:高纯氮气,载气流速:1.0 mL/min,分流比:30:1,进样量:0.3 μL,进样口温度:250 ℃,升温程序:初始温度60 ℃,保持5 min,以4 ℃/min升至240 ℃,在240 ℃下保持2 min,氢火焰离子检测器温度:250 ℃,氢气流量:30 mL/min,空气流量:400 mL/min,在相同色谱条件下C7~C40正构烷烃出峰时间计算各组分的相对保留指数[10]。用峰面积归一化法计算各组分的相对百分含量。
1.3.4挥发油成份GC-MS分析
色谱条件:采用四极杆飞行时间高分辨质谱(GC-MS)安捷伦7890B气相色谱系统,涂层为(5%苯基)-甲基聚硅氧烷的HP-5MS熔融石英毛细管柱(内径30 m×0.25 mm,膜厚0.25 μm)进行分析。载气:高纯氮气,载气流速:1.0 mL/min,分流比:30:1,进样量:0.3 μL,进样口温度:250 ℃,升温程序:初始温度60 ℃,保持5 min,以4 ℃/min升至240 ℃,在240 ℃下保持2 min,传输线温度:280 ℃,采用 NIST14标准谱库进行检索。
质谱条件:电离模式:EI,电子能量:70 Ev,扫描质量范围m/z: 50~500 amu,采样频率50 Hz,采样模式:全扫描,溶剂延迟时间5 min,离子源温度230 ℃,四极杆温度150 ℃。
1.3.5挥发油的抗氧化活性测定
DPPH自由基清除能力测定:DPPH自由基清除率的测定参照Reis等[11]的方法并稍作修改。将100 μL不同浓度的挥发油-乙醇溶液与等体积DPPH-乙醇溶液(0.2 mmol/L)混合。在室温下避光反应30 min,用酶标仪(Bio-Rad 550)于517 nm波长处测量吸光度。