1.3.3  外源蛋白酶添加酶解

首先将准备好新鲜鸡肉脯均匀分割，取50 g的鸡肉脯分成两份相同重量，用刀背剁成鸡肉泥。一个加酶做样品，另一个不加酶做对比实验。分别加1:3的蒸馏水匀浆1 min。使鸡肉泥完全溶于蒸馏水中。当水浴锅的温度到达90 ℃时，放入水浴锅加热10 min，使其变性，灭活蛋白酶，杀死鸡肉中本身的蛋白酶，减少不确定因素。防止鸡肉中本身的蛋白酶影响实验效果。

热处理后进行快速冷却，冷却到胰蛋白酶所需要的作用温度40 ℃时，PH为7.0—8.0之间，加入胰蛋白酶，测出胰蛋白酶含量在鸡汤中对低聚肽的影响。在酶解过程中要保证恒温搅拌操作，各样品水解6 h。酶解完毕。所得的酶解液放入沸水中灭酶20 min。然后取出过滤，过滤后的酶解液离心（4800 rpm，20 min）。所得滤液就是酶解产物的。

1.4  标准曲线

试管中分别加入0 mL、0.30 mL、0.60 mL、0.90 mL、1.20 mL、1.50 mL标准蛋白质溶液，用蒸馏水补足到1.50 mL。加1.50 mL的 6 %氢氧化钠溶液，搅拌均匀后，再加入0.15 mL微量双缩脲试剂充分混匀后，在室温下放置15 min，然后于330 nm进行比色，纵坐标为吸光度值横坐标为牛血清蛋白浓度做标准曲线。