3.1.1 1-羟乙基-3-甲基咪唑基Fe3O4纳米磁流体用量的确定
为考察1-羟乙基-3-甲基咪唑基Fe3O4纳米磁流体用量对萃取效果的影响，实验以加入不同质量的1-羟乙基-3-甲基咪唑基Fe3O4纳米磁流体分别与水形成双水相体系，加入0.5 mL相同浓度的过氧化氢酶溶液，于相同条件下进行萃取分离，并对酶活性进行测定。由图1(a)可知，在加入量较低时，酶的萃取效果较差，随离子液体加入量的提高，酶活性逐渐升高，当加入量达到175mg时，萃取效果最好，之后随着离子液体加入量升高，酶活性逐渐降低，因此离子液体加入量应控制在175mg。
3.1.2 萃取温度的确定
为考察温度对萃取效果的影响，实验以加入175mg1-羟乙基-3-甲基咪唑基Fe3O4纳米磁流体和1.5mL水制备磁性固相萃取体系，并加入0.5 mL相同浓度的过氧化氢酶溶液，将其分别置于20、25、30、35、40 ℃条件下进行萃取，并对萃取后的酶活性进行测定。结果如图1(b)所示，其他条件不变的情况下，酶在其最适的提取温度下酶活最高，由图可得CAT在35℃下萃取所得酶活最高，因此萃取温度的最优值为35 ℃。
3.1.3 萃取时间的确定
保持其它实验条件不变的情况下，考察了萃取时间对酶活性的影响。实验以175mg 1-羟乙基-3-甲基咪唑基Fe3O4纳米磁流体和1.5mL水制备磁性固相萃取体系，并加入0.5 mL一定浓度的过氧化氢酶溶液，于35 ℃条件下分别萃取20、25、30、35 、40min，并对萃取后的酶活性进行测定。结果如图1(c)所示。随萃取时间增加，过氧化氢酶活性逐渐增加，当萃取时间达到30 min后，酶活性逐渐稳定，因此，萃取时间选择为30 min。
