萝卜硫素提取物的抗辐射功效检测
更新日期:2020-12-29     来源:食品工业   作者:郭彩慧  浏览次数:204
核心提示:1.3.4 萝卜硫素提取物的抗辐射功效检测根据正交试验中确定的最佳提取条件提取SFN,用无水乙醇将SFN提取物配制成SFN浓度为3 g/gDW,6 g/gDW,9 g/gDW,

1.3.4  萝卜硫素提取物的抗辐射功效检测

根据正交试验中确定的最佳提取条件提取SFN,用无水乙醇将SFN提取物配制成SFN浓度为3 μg/gDW,6 μg/gDW,9 μg/gDW,12 μg/gDW的乙醇溶液,取200 μL不同浓度样品分别加至96孔板中,平行4次,使用酶标仪扫描样品在280-320 nm处的紫外吸收光谱图[16, 17]

1.3.5  萝卜硫素提取物的DPPH抗氧化检测

DPPH自由基乙醇溶液呈深紫色,在515~520 nm处有最大吸收峰,加入抗氧化剂后被还原,吸光值降低,降低程度与抗氧化剂呈剂量关系,可由酶标仪测得[18]

无水乙醇将SFN提取物配制成SFN浓度为3 μg/gDW,6 μg/gDW,9 μg/gDW,12 μg/gDW,18 μg/gDW,24 μg/gDW,36 μg/gDW,48 μg/gDW的乙醇溶液。用移液器吸取90 μL浓度为100 μmol/L的DPPH溶液至96孔板中,并在相应样品孔中加入10 μL不同浓度的SFN溶液,每个梯度设置4个平行,室温避光放置1 h,在520 nm处检测吸光值,记为A1,空白组用无水乙醇代替样品溶液,吸光值记为A0[19,20]

DPPH自由基清除率(%)=(A0-A1)/A0                          公式(1)

1.3.6  萝卜硫素提取物的ABTS抗氧化检测

ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的ABTS·+,在抗氧化物存在时,ABTS·+的产生会被抑制,在734 nm测定ABTS·+的吸光度即可测定并计算出样品的总抗氧化能力[21]

在样品检测前,使用等体积ABTS溶液和氧化剂溶液配制ABTS 工作母液,室温避光存放12-16 h后,将ABTS工作母液用80%乙醇稀释成ABTS工作液,减去空白组吸光值的ABTS工作液吸光值A734应为0.7±0.05。用80%乙醇将SF提取物配制成SFN浓度为3 μg/gDW,6 μg/gDW,9 μg/gDW,12 μg/gDW,18 μg/gDW,24 μg/gDW,36 μg/gDW,48 μg/gDW的乙醇溶液。用移液器移取190 μL ABTS工作液,加入10 μL不同浓度的样品溶液,混匀,每个梯度设置4个平行,室温避光保存1 h,在734 nm测定吸光值,记为A1,空白组用80%乙醇代替样品溶液,吸光值记为A0[20,22,23]