1.2.4  盐对小鼠腹腔巨噬细胞炎症的作用

小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）培养。复苏RAW264.7，用含10%胎牛血清的DMEM培养液，于5%CO2、37 ℃饱和湿度的培养箱中培养。传至3代后，待细胞状态稳定后移至孔板中（每孔1×105）孵育至对数生长期，分组实验，每组设置复孔。

盐样品毒性测定。实验分组：配制最终样品浓度分别0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8%的DMEM细胞培养液。在96孔板中加入混合均匀的细胞悬浮液100 μL（每孔1×105），培养24 h后移去培养基，按上述分组分别处理细胞24 h，采用MTT法测定不同浓度样品对细胞存活率的影响，选择无显著性差异的样品浓度进行后续实验。

炎症模型建立。实验分组：配制脂多糖（LPS）浓度分别为0.25、0.5、1、2、4 mg/L的DMEM细胞培养液。在24孔板中加入混合均匀的细胞悬浮液1 mL（每孔1×105），培养24 h后移去培养基，按上述分组分别处理细胞24 h。采用Griess试剂盒测定上述细胞上清液的NO含量，选择NO释放量与对照组有显著性差异的LPS浓度进行后续实验。