2.2 TCF7L1的表达与鼻咽癌放疗敏感性密切相关
为进一步明确TCF7L1在鼻咽癌放疗敏感性中的作用,我们构建了TCF7L1的敲低载体,并包装为慢病毒。人鼻咽癌细胞系CNE-2随后分为Scramble组与TCF7L1-shRNA组,分别感染Scramble与TCF7L1-shRNA慢病毒,48h后,使用western blot与QPCR检测敲低效率,结果表明TCF7L1在蛋白(图2A)与mRNA(图2B)水平均显著降低。Scramble组与TCF7L1-shRNA组细胞随后使用0、2、4、6 Gy辐射处理后,使用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡变化,结果表明在经过6Gy辐照72h后,Scramble组与TCF7L1-shRNA组 Annexin V+细胞比例(%)分别为15.24±4.19 vs 23.69±4.82,TCF7L1-shRNA组显著高于Scramble组。通过CCK8法检测细胞增殖,结果表明接受了6Gy辐照的TCF7L1-shRNA的细胞增值能力显著下降(图2C)。进一步通过高浓度PI染色检测细胞周期,结果表明在经过2、4、6 Gy辐照后的Scramble与TCF7L1-shRNA细胞中,TCF7L1-shRNA组G2均显著低于同等强度辐照过的Scramble组。