2.2 CDPK基因缺失虫株
钙依赖蛋白激酶家族(Calcium- dependent protein kinases,CDPKs)广泛存在与植物和顶复门寄生虫,调节着胞内外钙离子信号通路。研究表明,CDPK2是支链淀粉代谢中必须的调节因子,对弓形虫缓殖子的发育具有重要的作用[9]。Wang利用CRISPR/Cas9技术,对Pru虫株CDPK2进行敲除后,发现PruΔcdpk2虫株接种的小鼠产生了高水平的免疫保护力,可以显著降低I型虫株对小鼠的致死率[10]。
2.3 LDH基因缺失虫株
在弓形虫的代谢途径中,糖酵解途径在速殖子和缓殖子时期都有所表达。前期研究发现,糖酵解途径中有两个催化丙酮酸与乳酸相互转化的关键酶,分别是乳酸脱氢酶1(LDH1)和乳酸脱氢酶2(LDH2)[11]。Xia对ME49虫株LDH1和LDH2同时进行敲除后,发现ME49Δldh虫株无法在体内进行繁殖。后续小鼠免疫评估试验中又发现,ME49Δldh可诱导产生高水平IgG,有效抵抗RH、ME49等野生型虫株的感染。不仅如此,ME49Δldh虫株还可以诱导细胞免疫,可以刺激小鼠脾细胞产生高水平的细胞因子,如INF-γ和TNF-α[12]。