三、 激光捕获显微切割技术在皮肤病学研究领域的应用
      LCM 技术在病理学、法医学、传染病 学、植物科研等领域应用广泛[4]。而在皮 肤病学研究领域应用较少，现今应用综述 如下。
3.1 正常皮肤研究
      LCM 技术在正常皮肤基因组学的研究 中起到了不可替代的作用。2003 年，N. S. Agar 等[5]利用 LCM 技术从人表皮中获取 角质形成细胞，从而提取 DNA 应用于序列 分析，进一步绘制正常皮肤、光化性角化 病和鳞癌中目标基因的基因组突变模式。
      2012 年 Percoco G.等[6]首次描述基 于 LCM 分离人表皮层的技术，并通过实时 定量 PCR 分析基因表达谱。他们用 LCM 技 术分离出基底层和颗粒层,提取总 RNA， 分析发现 Toll 样受体-2（Toll-like 图一：LCM 技术操作流程（The workflow of LCM）：提取组织标本后，将组织冰冻 或石蜡包埋并切片，染色以鉴定细胞。使用 LCM 系统捕获来自切片组织的细胞，并在 LCM 帽上可视化。提取目的细胞的 DNA、RNA 及蛋白质等，进行下游分析。 提取组 织标本 冰冻切 片或石 蜡切片 染色 显微激 光切割 分析 DNA、 RNA、 蛋白质 下游分 析 receptors-2, TLR2）、核糖核酸酶 7 （RNase7）、人β防御素-2（Human BetaDefensin-2 ， HBD-2 ）、 人 β 防御 素 -3 （Human Beta-Defensin-3，HBD-3）、银 屑病相关蛋白（psoriasin）和核苷酸结 合寡聚域 1 （ Nucleotide-binding Oligomerization Domain 1，NOD1）在正 常人表皮上基底层表达上调。次年， Nicholas G.等[7]利用 LCM 技术分离了正 常皮肤真皮网状层、表皮基底层和基底层 上(棘层、颗粒层和角质层)三个区域，并 分析生成各层的基因表达谱。LCM 捕获到 的表皮全层与基底层上表皮的基因表达 截然不同，能够很好的区分开基底层，这 表明 LCM 技术在捕获基底层细胞时有很 好的靶向性。