1.5 分子标记物的衍生化和GC-MS分析
在萃取物中加入1 mL二氯甲烷:甲醇,取200 uL氮吹干,加入90 uL双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺和10 uL的无水吡啶70C烘箱中反应3 h,冷却后加入400 uL的正己烷,进行GC-MS测定。
1.6 土样元素组成分析
土样元素组成采用元素分析仪(vario MICRO cube Elementar, Germany)测定C、H、N、S四种元素含量,每个样品设三个平行,取平均值。
1.7高通量测序分析土壤微生物结构
微生物多样性是基于Illumina HiSeq测序平台,利用双末端测序(Paired-End)的方法, 构建小片段文库进行测序。细菌基于16S rRNA扩增,真菌基于18S区或ITS区(内转录间区)扩增。
1.8 数据分析与处理
利用SPSS进行单因素方差统计分析不同处理土壤可提取游离态脂和木质素衍生酚差异的显著性分析(P<0.05),利用Origin 2017进行绘图分析。
2 结果与讨论
2.1 不同农业活动土样的元素分析
土壤有机碳库是评价土壤质量和土壤肥力的重要指标,土壤耕作模式和有机肥施用方式对有机碳库水平有重要影响[17]。不同农业活动土壤有机质的元素组成如表2所示,Y代表芸岭地区土样,Z代表中农地区土样,芸岭和中农土壤施加有机肥后碳含量明显增高,C/N降低,说明施加有机肥后作物根际分泌物增多,使微生物活性增强,短期生成大量溶解性有机物[18, 19]。