1.3.1 藜麦多糖的提取工艺

以红色藜麦为例，研究藜麦多糖的提取工艺。藜麦多糖提取步骤如图1所示，藜麦清理除杂后，50℃烘干至恒重，粉碎后过60目筛，称取藜麦粉100 g，加入10倍体积的石油醚（沸程：60-90℃），混合均匀后静置过夜，离心（4000 r/min，10min）去除脂类和色素。沉淀物中加入10倍体积95%的乙醇，混合均匀后静置过夜，离心（4000 r/min，10min）去除单糖和低聚糖。沉淀物室温风干后，50℃烘干至恒重，抽真空后，4℃储存备用。

处理后的样品中加入蒸馏水，调节pH，加入纤维素酶，在一定温度下进行酶解，将上述混合溶液进行超声辅助提取。通过Plackett-Burman试验和Box-Behnken响应面优化多糖提取工艺。提取液离心（4000 r/min，10min）后，移取上清液，加入4倍体积的95%乙醇，4℃下醇沉24h。离心（4000 r/min，10min）后，收集沉淀物，依次使用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤沉淀物，Sevage试剂去除蛋白，真空冷冻干燥得到粗多糖^[18]。

1.3.2藜麦多糖提取Plackett-Burman试验设计

为了选择出对藜麦多糖得率影响最大的因素，根据单因素预实验结果，以多糖得率作为响应值，利用Design-Expert 12设计实验次数N=12的Plackett-Burman试验，考察酶添加量（A）、酶解pH（B）、酶解温度（C）、酶解时间（D）、超声温度（E）、超声时间（F）、料液比（G）7个因素，另设4个虚拟列（H-K）。每个因素选择两个水平，分别为高水平（+1）和低水平（-1）。