摘 要 目的 研究乳腺癌组织中FGF4对细胞迁移的影响。方法 应用重组质粒pCDNA3.1-FGF4和RNA干扰技术分别对低转移乳腺癌细胞株T47D和高转移乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的FGF4分别进行过表达和干扰并验证，对处理前后的细胞株进行划痕实验，观察FGF4对乳腺癌细胞株转移能力的影响。
结果 在低转移乳腺癌细胞株T47D中成功过表达FGF4后细胞株的迁移能力明显提高，而在高转移乳腺癌细胞株MDA-MB-231中成功干扰FGF4后细胞株的迁移能力明显降低。 结论 乳腺癌中FGF4的高表达促进了乳腺癌细胞株的转移，因此临床上有必要监测FGF4的表达水平，从而有效地评估乳腺癌的转移及预后情况。
关键词 成纤维生长因子4 乳腺癌 迁移
近年来，作为女性恶性肿瘤之一的乳腺癌，其发生率和病死率呈逐年上升趋势，发病群体也逐渐趋于年轻化。资料显示世界范围内，女性肿瘤中乳腺癌患者占25%，且女性肿瘤死亡病例中，乳腺癌占15%。造成患者死亡的主要原因是肿瘤的复发和转移，乳腺癌的远处转移大大降低了患者的预后情况，造成患者生存期缩短。回首过去的二十年，乳腺癌的诊治取得了长足的进展，尤其是在外科治疗方面的发展取得了较好的效果。但是针对乳腺癌的预后，尤其是已发生侵袭转移的晚期患者预后依然较差，侵袭转移机制亦已成为当今的研究热点，因此临床上急需探寻影响乳腺癌细胞转移的因素。
成纤维生长因子( fibroblast growth factor , FGF）及其受体紧密调节着各种生物过程,其中包括细胞的增殖、分化和迁移，在胚胎的发育、血管的生成以及成年人的伤口愈合中也起着举足轻重的作用。成纤维生长因子4（ fibroblast growth factor4 , FGF4）作为第一个在哺乳细胞胚胎发生过程中表达的FGF家族成员，它在胚胎发育、细胞分化和细胞迁移中起着至关重要的作用，但是它在乳腺癌的发生和转移中，机制还不是研究地十分清楚。本研究将主要观察FGF4 在乳腺癌细胞株中的表达，并利用重组质粒和RNA干扰技术，构建过表达FGF4和敲除FGF4 的稳定细胞株，观察人乳腺癌细胞株转移情况，从而进一步地研究FGF4对乳腺癌细胞株转移的影响。

材料与方法
1.材料：人乳腺癌细胞系T47D/MDA-MB-231购自American Tissue Culture Collection (ATCC)，在本实验室进行常规传代。
2.试剂：Trizol试剂、RNA 酶抑制剂、RNA 逆转录试剂盒及SYBR Green RT-PCR试剂盒均购自Invitrogen 公司，PCR引物、shRNA由华大基因合成，Anti-FGF4抗体购自Proteintech Group，Western ECL发光试剂盒购自武汉三鹰公司，RPMI1640培养基和胎牛血清购自Gibco公司。限制性内切酶EcoRI/XholI、琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液购自Thermo 公司，Taq DNA聚合酶、FastPful DNA 聚合酶、DNA连接酶购自购北京全式金生物技术有限公司，DNA切胶纯化试剂盒、质粒小提试剂盒购自博迈德生物公司，RIPA购自Solibro公司。
作者：曲杰