1.3Lv-ddit4l基因序列的验证

基于高温胁迫实验样品转录组测序获得的ddit4l基因的参考序列，使用Primer Premier 5.0软件设计cDNA序列扩增和基因表达定量所用引物，由上海生工生物技术服务有限公司进行合成。

以反转录获得的cDNA为模板，利用上游引物ddit4l-F和下游引物ddit4l-R通过普通PCR扩增cDNA序列。PCR反应程序为：94℃预变性2 min；98℃变性30 s，退火温度61℃ 30 s，68℃延伸1 min，35个循环；68℃5 min。反应结束后进行琼脂糖凝胶电泳确定扩增产物特异性和片段大小。PCR产物委托上海生工生物工程技术服务有限公司进行sanger测序。将测序结果与转录组中序列进行对比，验证Lv-ddit4l的cDNA序列。