1.3.10 Western Blot检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中CDC25A、CDC25B、IL6、AR、PGR、ESR1、PTGS2、PPARα和PPARγ蛋白的表达

用浓度为100、200和400mg/kg的HD处理H22荷瘤小鼠14天后取瘤体，使用RIPA强裂解液收集瘤体总蛋白，使用BCA试剂盒检测蛋白浓度。在10%的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中分理出的蛋白裂解物并转移至聚偏氟乙烯(PVDF)膜上，在37℃下使用5％脱脂奶粉进行封闭，按照抗体说明书进行稀释并在4℃孵育过夜，二抗（1:5000）在37℃孵育1h 30 min，最后使用ECL化学发光试剂盒显影，使用ImageJ软件进行数据分析。

1.4 统计分析

采用R软件和GraphPad Prism 8.0软件(GraphPad Software Inc)进行绘图和分析，两组间的差异分别用t检验分析，实验结果采用均数±标准差(`x±SD)的形式表示，二组独立样本均数的显著性采用t检验，多组样本采用Two-away ANOVA分析，以P<0.05或P<0.01为有统计学意义，实验独立重复三次。