【摘要】 目的 研究分化相关基因NDRG2在胃癌细胞中的表达及与细胞分化的关系。方法 采用RT-PCR及Western blot检测胃永生化粘膜上皮细胞GES1及6株胃癌细胞株中NDRG2 的mRNA及蛋白表达，分化诱导剂TPA处理低或无NDRG2表达的胃癌细胞株，分析NDRG2的表达及恶性表型是否可逆转。结果 与胃永生化粘膜上皮细胞GES1相比，NDRG2在6株胃癌细胞中不同程度的表达下调，HGC27 中表达最低。不同浓度的分化诱导剂TPA（0,10,50,100nmol/l）处理胃癌细胞株HGC27后，随TPA浓度升高NDRG2表达上调，100nmol/l组表达最高，Transwell实验显示TPA干预组胃癌细胞的侵袭力明显减弱。 结论 NDRG2在胃癌中可能是一种候选的肿瘤抑制基因，与细胞分化成正相关，分化诱导剂干预可逆转NDRG1表达及恶性表型。
关键词 胃癌；分化相关基因；NDRG2；细胞分化
NDRG2（N-myc downstream regulated gene 2）是我国第四军医大学发现的一种与细胞分化相关的基因，属于NDRG家族，该家族包括4个成员，即NDRG1-4，各成员间有57-65%的氨基酸具有同源性[1]。NDRG2基因定位于人染色体14q11.2，编码357个氨基酸残基的蛋白，分子量约为41kDa，在人体多种组织中均有表达，不同程度的参与细胞的生长发育及分化成熟等[2-4]。近年的研究报道，NDRG2在多种肿瘤组织中表达下调，甚至不表达，发挥特定的抑癌作用[5-7]。作为一种分化相关基因，NDRG2与胃癌的关系尚缺乏研究，目前诱导分化治疗已成功运用于白血病，而在实体瘤中仍缺乏依据。本研究重在探讨NDRG2在胃癌细胞中的表达及与细胞分化的关系，为胃癌的分化治疗提供新的依据。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
胃永生化粘膜上皮细胞GES1及6株胃癌细胞SGC7901, MGC803, MKN45, BGC823, AGS和HGC27均购自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物研究所。采用Invitrogen 公司的TRizol试剂提取总RNA，采用Fermentas公司的RT-PCR逆转录试剂盒及 DreamTaq DNA聚合酶行2步法RT-PCR. RPMI 1640购自GibcoBRL公司，胎牛血清购自杭州四季青生物工程公司。BCA试剂盒、ECL发光剂及TPA试剂购自上海碧云天生物公司。Matrigel胶购自美国BD 公司，Transwell小室购自美国Corning公司。引物由上海华大公司合成。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养 人胃永生化粘膜上皮细胞GES1和胃癌细胞株SGC7901, MGC803， MKN45，BGC823，AGC和HGC27，单层贴壁生长于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中， 37℃，5%CO2培养箱中培养，隔天换液，取对数生长期细胞进行试验。
TPA处理 胃癌细胞HGC27以5×105接种于6孔板，含10%胎牛血清的RPMI1640培养液，37℃，5%CO2培养箱中培养过夜。TPA（碧云天，上海，中国）以10,50,100nmol/l培养3天，对照组为不加TPA的1640培养液培养。
作者：常晓静