摘要：本文以紫纹羽卷担菌野生标本为材料，通过组织分离法纯化获得菌种，并设计试验方案，确定了该菌种菌丝体、子实体规模化培养条件和工艺。进行培养特性的研究，旨在探明该菌种的生物学特性和生长特性，为该菌的应用研究提供必要的理论依据。单因素试验结果表明，菌丝体培养最佳有机添加物为黄豆粉、最佳碳源为麦芽糖、最佳氮源为硝酸钠、最佳pH为7；均匀试验结果表明，菌丝体最佳培养基配方为黄豆粉3.5%、pH8、麦芽糖2.5%、硝酸钠0.1%；子实体试验研究结果表明，覆土培养更容易形成子实体。
关键词：紫纹羽卷担菌、菌丝体培养、子实体培养
1 前言
随着工农业的快速发展，农药及化肥的广泛使用，土壤及水体重金属污染越来越严重，重金属污染修复是我国现阶段亟待解决的一个重大问题。目前，重金属污染修复技术主要包括物理、化学、生物、农业生态和联合修复技术等(1)。贺新生等人发现紫纹羽卷担菌(Helicobasidium mompa)可用作富集土壤及水体中的重金属。该方法操作简便、生产成本低、适应范围广，没有二次污染(2)。紫纹羽卷担菌(Helicobasidium mompa)属卷担菌(Helicobasidiaceae)科，卷担菌目(Helicobasidiales)，柄锈菌纲(Pucciniomycetes)，柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)，是一种常见的树木根腐病。近年来，多有报道在甘薯、党参、番薯、果树等植物中发现该菌(3)。田立道、陈培根等首次在1978年成功分离该菌种(4)。该菌担孢子多在雨季形成，雨水多，阳光少，高温高湿条件下菌丝生长快(5)。迄今为止，还未有人优化过该菌的培养条件，使其更好地应用到重金属防治中。
2 材料与方法
2.1 供试菌株
紫纹羽卷担菌H. mompa，分离菌株编号：HE2917。
2.2 菌丝体培养条件试验
2.2.1 组织分离
培养基配方：2%葡萄糖，0.1%蛋白胨，2%琼脂，pH自然
选取采集到的新鲜子实体，无菌水侵泡2-3d。接种时，用无菌水冲洗100-200遍，研磨至液体状态，稀释10倍，平板划线法接种后置于25℃的恒温培养箱内，每天显微镜观察，发现紫红色菌丝，立即挑出转入试管培养基，多次转接纯化。
2.2.2 不同培养基试验
每个培养基设置5个重复，pH自然，将活化好的菌种接种到上述培养基，在温度为25℃的恒温培养箱中根据菌丝生长情况培养4-5d，每隔1d沿着垂直两个方向测一次菌落直径，记录菌丝浓密程度及颜色变化，数据处理时取平均值。
2.2.3 不同pH试验
在选出的最适培养基上，设置pH5、pH6、pH7、pH8共4个处理。
2.2.4 碳源试验
分别用乳糖、蔗糖、可溶性淀粉、果糖和麦芽糖等量代替PDA培养基中的葡萄糖，C含量一定。
2.2.5 氮源试验
分别用乳糖、蔗糖、可溶性淀粉、果糖和麦芽糖等量代替PDA培养基中的蛋白胨，N含量一定。
作者：张桂兰