成人粪样中雌马酚含量高效液相色谱法检测
更新日期:2018-07-03     来源:世界华人消化杂志   浏览次数:211
核心提示:摘要目的:建立一种利用高效液相色谱法检测人体粪样中雌马酚的方法。方法:用高效液相色谱法检测成人粪样中雌马酚含量,并用生物统计学软件SPSS21.0进

摘要 目的:建立一种利用高效液相色谱法检测人体粪样中雌马酚的方法。方法:用高效液相色谱法检测成人粪样中雌马酚含量,并用生物统计学软件SPSS21.0进行统计学分析。结果:色谱柱为Unitary C18,5μm,100A(4.6×250mm),流动相为V(乙腈):V(甲醇):V(甲酸)=30:20:50,流速为0.8mL/min,柱温为30℃,双波长检测器检测波长为205nm,可以较好地分离和测定样品中的雌马酚。该方法的线性范围为0.50~10μg/mL;样品回收率109.33%,相对偏差RSD为3.72%;重复性检验的相对标准偏差为0.41%;日内精密度的相对标准偏差为4.96%;线性相关系数R2=0.9990。结论:本实验方法简单、精确,能较准确的检测人体粪样中雌马酚的含量。
关键词:粪样;雌马酚;高效液相色谱法
雌马酚(Equol, Eq)由Martian于1932年首次提出,因为是在怀孕的马尿液提取出来,被命名为雌马酚,化学分子式为C15H14O3。研究发现,雌马酚为大豆异黄酮在肠道的分解产物之一。其生物学活性比大豆异黄酮更高[1]。目前认为雌马酚的主要作用为雌激素与抗雌激素、抗氧化作用。雌马酚能够抑制一氧化氮(NO)的产生,通过诱导小鼠巨噬细胞中一氧化氮合酶基因的表达,来降低NF-κB的活性[3]。此外,较其前体物质,雌马酚在人类中有更高的自由基比率[4]以及更低的血浆清除率[5]。病理学研究指出雌马酚治疗疾病 方面有明显疗效[6]。例如,可预防人类的乳腺癌、前列腺癌,治疗骨质疏松症和更年期综合症等疾病。有文献指出,仅有部分人群能产生雌马酚[7]。有30%~50%的美国和亚洲人能将大豆异黄酮转化为雌马酚,可能与肠道生理环境、宿主基因、饮食因素等因素有关。美国白种人中产生雌马酚的比例低于韩裔美国人[8],非素食者中产雌马酚的比例低于素食者[9]
目前,常用的检测雌马酚的方法多种多样。主要有紫外法[10]、薄层色谱法与高效液相色谱法[11]、气相色谱法、液相色谱-质谱法[12]和酶标记免疫吸附测定法[13]等。其中,由于高效液相色谱法(HPLC)操作简单、样品分离度好、定量准确、可行单体检测,而被广泛使用。本研究采用高效液相色谱法对粪样的雌马酚的含量进行检测。
作者:王文宁
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