【摘要】目的:比较与分析不同产地、不同生长年限及不同炮制方法黄芪中黄芪甲苷和四种异黄酮类成分的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),色谱条件:黄芪甲苷:蒸发光散射检测器,雾化温度30℃,漂移管温度60 ℃,载气流速为1.0 mL·min-1 ,流动相为乙腈:水(32:68)。异黄酮类成分:乙腈:0.2%甲酸,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,紫外检测波长为260 nm,柱温为40 ℃。结果:线性范围:黄芪甲苷18.98~51.00μg·L-1;毛蕊异黄酮葡萄糖苷6.44~15.67μg·L-1;毛蕊异黄酮2.40~5.83μg·L-1;芒柄花素2.50~6.32μg·L-1;芒柄花苷4.71~11.51μg·L-1。结论:该方法可简单、快速、有效的测定不同产地黄芪中各有效成分的含量,分析与比较了各成分的含量,为其质量评价和制定地方质量标准提供了很好的依据。
【关键词】黄芪;黄芪甲苷;异黄酮;高效液相色谱
黄芪为豆科植物膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.),蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao的干燥根,其主产于甘肃、山西、河北等省区[1]。黄芪主要含有皂苷类、黄酮类、多糖和氨基酸类成分[2],近年来的研究结果表明[3-5],黄芪中黄芪甲苷具有抗病毒、促生长及改善心肺等功能。黄酮类成分具有调节免疫、抗心肌缺血及清除自由基等多种药理作用。
已有相关文献报导了测定不同产地黄芪中各成分的含量[6-7],本研究根据15版药典的基本规定鉴定了不同产地的药材[8],同时根据相关文献对药材中黄芪甲苷的不同提取方法进行了比较[9-10]。测定了不同产地、不同生长年限及不同炮制方法蒙古黄芪中各有效成分的含量,并对其进行相关分析及探讨,对其质量控制和制定质量标准提供依据。
1 仪器与试药
1.1 日本岛津高效液相色谱仪(LC-20AT泵、SPD-20A检测器、Lesolution工作站,2420蒸发光散射检测器、2487紫外检测器);BS124S电子分析天平(万分之一,Sartorius赛多利斯);KQ5200DE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);旋转蒸发仪(上海树立生化仪器厂);HHS型水浴锅(上海锦屏仪器仪表有限公司)。
1.2 黄芪药材采自山西(编号H1)、内蒙(编号H2,H3)、甘肃省定西五个县(编号H4、H5、H6、H7、H8)、武川(编号H9、H10、H11、HH12、HZ12)等地,武川12号样品分为HH12横切与HZ12纵切不同的炮制方法,共12批,经广州中医药大学李卫民教授鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao的干燥根。对照品黄芪甲苷(批号:MUST-16022904),毛蕊异黄酮葡萄糖苷(批号:MUST-16031206),毛蕊异黄酮(编号:MUST-16031110),芒柄花素(批号:MUST-16031005),芒柄花苷(批号:MUST-16031111),均购于成都曼思特生物科技有限公司。
1.3 甲酸(天津市富宇精细化工有限公司)、乙腈和甲醇(德国默克)均为色谱纯、水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
作者:党院霞