1.3免疫组化染色 将所收集的病理标本使用PBS洗2遍后固定于10%福尔马林溶液中,24小时后将其使用石蜡包被并制备成4μM的石蜡切片备用。采用免疫组化试剂盒染色(武汉博士德生物工程有限公司)行免疫组化染色,石蜡切片脱蜡至水后行过氧化氢抗原修复30分钟,BSA封闭完毕后使用TMIGD1抗体染色过夜(货号:bs-9427R,北京博奥森生物技术有限公司,浓度1:20)。免疫组化评分如之前文献所述[5]。
1.4生物信息学分析 使用TCGA数据库检索胃癌组织及正常胃黏膜组织样本中TIMGD1的表达情况,通过行GSEA分析比较高表达及低表达TMIGD1胃癌患者病理组织生物学差异,特别是对于细胞侵袭迁移的影响。