1.3 Transwell小室试验
迁移实验:取对数生长期鼻咽癌CNE2细胞,用胰酶消化为细胞悬液,用细胞计数板将密度调整为5×105个/ml。向对应的孔中加入500μl含15%FBS的1640,细胞悬液200μl加入到Transwell迁移小室,然后将小室轻轻放入含15%FBS的1640培养基的对应孔中,放回孵箱,常规培养24h;24h后,弃去小室内液体,用棉签擦去小室内面的细胞,用PBS漂洗3次,置于4%多聚甲醛中固定20min;再置于0.1%结晶紫中染色20min;随后取下小室的底膜,将其贴在载玻片上,盖上盖玻片;每张膜随机取5个视野(×200),在显微镜下计数小室下室面的细胞数。侵袭实验:选用铺胶的侵袭小室,其余步骤同迁移实验。
1.4 免疫荧光实验
制备鼻咽癌CNE2细胞爬片,各细胞组经白藜芦醇处理后,按免疫荧光化学试验步骤处理,在湿盒中避光室温孵育2h,用含抗荧光淬灭剂和DAPI的封片液封片,在荧光显微镜下观察并采集图像,观察NF-κB/p65的核转位情况。