1.3不同提取方法的比较

在5g不含MG和LMG的阴性样品中分别添加1mL 0.5μg/mL的孔雀石绿和隐性孔雀石绿标准溶液，基于国家标准GB/T19857-2005的提取方法，进行步骤删减，考察不同提取方法的提取率。

1.3.1国标法提取

完全按照国标法GB/T19857-2005进行提取：取5.0g鱼肉，添加稳定剂（1mL盐酸羟胺溶液、2mL对-甲苯磺酸溶液、2mL乙酸铵缓冲液），加入40mL乙腈均质、离心，将上清液转移至250mL分液漏斗中，再加入20mL乙腈清洗残渣，合并上清液。在分液漏斗中加入50mL二氯甲烷分两次萃取，取下层二氯甲烷层，旋蒸浓缩近干。净化：用6mL乙腈分三次洗涤溶解，过200-300目中性氧化铝层析柱和阳离子交换柱，先用2mL乙腈洗脱，然后弃去中性氧化铝柱，继续用3mL 2%甲酸、3mL乙腈淋洗阳离子交换柱，弃去流出液。用4mL 5%（v/v）乙酸铵甲醇溶液洗脱阳离子交换柱、用水定容至10mL，滤液过0.45μm滤膜过滤。