1.2.2 绒毛培养：（1）无菌操作下用镊子夹取绒毛组织置于弯盘中，倒入加有双抗的生理盐水，反复漂洗3~4次。（2）选取绒毛：形态良好的绒毛呈树根分枝状，色泽新鲜，长度粗短。剔除有血块的，用眼科剪剪取末端绒毛12~15枝，避免取到蜕膜组织。（3）将采集好的绒毛用眼科剪反复剪成糊状。（4）加入10mL生理盐水，再加入胰酶，使胰酶的终浓度为0.025%。（5）37℃水浴消化3~5分钟，2000rpm/10min。（6）弃上清，将处理好的绒毛平分于2个培养瓶中，每瓶加入5mL培养基，37℃，5%CO₂培养箱培养。（7）培养6~7d后，于4倍物镜下观察生长情况，如果绒毛贴壁良好，且周围有细胞生长，则可进行换液处理。换液后每天观察细胞生长情况。待细胞生长旺盛，整瓶有5~7个克隆以上，且每个克隆接近1个视野大小，内含多个圆形或双圆形透亮细胞时，即可收获。

1.2.3 细胞收获：（1）加秋 秋水仙素终浓度为0.2ug/mL，作用时间3~4小时。（2）低渗 0.075M 氯化钾与0.4%枸橼酸钠+0.4%氯化钾混合液按1:1的比例混合，37℃水浴低渗8分钟。（3）固定 经半固定、第一次固定、第二次固定后，制成细胞悬液。