按照1.6.4的分组及给药方法, 提取细胞总蛋白，采用 BCA 试剂盒测定蛋白浓度， 100℃水浴5 min变性后，进行SDS-PAGE凝胶电泳。半干转印，5%脱脂牛奶封闭1 h，一抗AGTR1 (1：750)，一抗Nephrin (1：3500) 4℃孵育16h, TBS洗膜，加入二抗 (1∶5000) ，室温孵育2 h，TBS清洗3次，使用化学发光成像系统进行检测。以 GAPDH 作为内参照进行半定量分析，记录AGTR1，Nephrin表达水平。

1.7统计学方法

采用 SPSS 20. 0 统计学软件进行数据分析。对本研究所得数据进行正态分布检验，若数据服从正态分布，计量资料用均数±标准差表示，多组间比较采用ANOVA方差分析，组间两两比较采用 q 检验。若不服从正态分布，计量资料采用中位数或四分位数进行统计描述，多组间比较采用秩和检验。假设检验水准设为0.05，计算出检验统计量及相应的P值，以P＜0.05为存在具有统计学意义的差异。