30%蔗糖溶液脱水固定。(2)将固定好的肿瘤标本用恒温冰冻切片机切片,厚度 40μm。
(3)切片用 10%山羊血清室温下封闭 30 分钟。(4)吸去山羊血清,PBS 冲洗标本,3 分
钟×3 次。(5)滴加 Notch-1 和 ABCG2 一抗(浓度都是 1:100),湿盒中 4℃过夜(16-
24 小时)。(6)次日弃去一抗,PBS 溶液冲洗,3 分钟×3 次。暗室中滴加二抗
(1:100),室温孵育 30 分钟,PBS 溶液冲洗,3 分钟×3 次。(7)滴加 Hochest33258,30
分钟,PBS 冲洗,3 分钟×3 次,切片避光自然晾干。(8)滴加荧光淬灭剂,荧光显微镜
下观察。