称取一定量的试样,加乙醇定容至25mL,摇匀,超声提取20min,放置,吸取上清液 1.0mL,于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,水浴挥去乙醇,然后转入层析柱(层析柱内径可根据每个产品具体情况确定)。先用20mL甲苯洗脱,弃去甲苯液;然后用甲醇洗脱,合并洗脱液并定容至25mL,即得。
1.3.1.3 测定
取标准系列工作液,于波长360nm测定吸光度,以芦丁标准工作液的浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。取试样溶液,于波长360nm测定吸光度,根据标准曲线得到试样溶液中总黄酮的浓度,平行测定次数不少于两次。
1.3.2 单因素实验考察
分析整个检验流程,其中样品粉碎粒、乙醇浓度、超声提取及静置时间、聚酰胺粉的吸附能力,洗脱溶剂品种可能是影响总黄酮提取的因素,通过对这些因素的考察,确定操作关键点。