1.2.2  DNA的提取  充分研磨收集的半夏样品，然后采用CTAB法对半夏基因组DNA进行提取，详细步骤参考李荣华等的研究^[15] 。通过电泳检测提取的DNA完整性，基于吸光度值测定分析其纯度及浓度。检测后的高质量DNA样品保存于-80℃，备用。

1.2.3  MSAP分析  基于限制性内切酶组合EcoR Ⅰ/Hpa Ⅱ和EcoR Ⅰ/Msp Ⅰ 分别对抽提的各组样品DNA进行酶切处理及接头连接。参照晁秋杰等人^[14] 的MSAP体系程序进行预扩增和选择性扩增，接头及相关扩增引物均交由通用生物系统（安徽）有限公司合成（表1）。扩增产物经6% 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显色后，统计相关引物扩增的总条带数，根据条带的有无进行甲基化状态分析。