1. 细胞培养:先将人胰腺癌PANC-1细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液培养,在 37℃、5% 二氧化碳湿化培养箱中培养,每2~3天传代1次。4组实验开始前先用0.25%胰蛋白酶将对数生长期人胰腺癌PANC-1细胞消化,用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,制成密度约 1×106 /ml的人胰腺癌PANC-1单细胞悬液。然后将人胰腺癌PANC-1单细胞悬液装入1.5 ml容积、底面积直径为13 mm平底圆形聚乙烯试管中,4组实验开始前根据分组加入不同体积的细胞液和六氟化硫造影剂微气泡,每管1 ml。