根据NCBI上马的MAVS(登录号：XM_023626166.1 )基因序列，针对全长eqMAVS设计特异性引物，上游引物eqMAVS-F：5’-ATGACGGTTGCCGAGGAC-3’；下游引物eqMAVS-R：5’-CTGGAGCAGGCGCCTACGG-3’。针对缺失跨膜域的eqMAVS  ΔTM设计特异性引物，上游引物eqMAVS ΔTM-F：5’-CGCGGATCCGCGATGACCGTGGCCGAG-3’；下游引物eqMAVS ΔTM-R：5’-CGCGCGGCCGCCCCAGGCACGGTCCAGCCG-3’。以马基因组cDNA为模板进行eqMAVS基因的扩增。PCR扩增体系50μL：2×PCR buffer 25 μL，dNTP 10 μL，上下游引物各 1 μL，模板 200 ng（c DNA），KOD FX 1 μL，ddH₂O 补至 50 μL。PCR反应条件：95℃预变性2min；98℃变性15s,52℃退火30s,68℃延申1min30s,共30个循环；68℃延伸10min，1%琼脂糖凝胶电泳后回收并纯化目的片段。目的片段与T载体室温连接5min，连接产物转化感受态DH5α，涂布于含氨苄抗性的LB平板，37℃倒置平板过夜培养，菌液鉴定阳性送哈尔滨瑞博测序，测序正确的重组质粒按照小提质粒试剂盒说明书进行质粒提取，命名T-eqMAVS，测量浓度后于-20℃保存。