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构建小鼠精原细胞氧化应激模型
更新日期:2022-04-03 浏览次数:134
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6.蛋白质印迹法实验:裂解细胞后,1200 r/min,离心半径 20cm,离心 5 min 取上清提取各组细胞蛋白,依据 BCA 测量的蛋白浓度结果调整各组蛋白浓度后
6.
蛋白质印迹法实验:裂解细胞后,
1200 r/min
,离心半径
20cm
,离心
5 min
取上清提
取各组细胞蛋白,依据
BCA
测量的蛋白浓度结果调整各组蛋白浓度后添加上样缓冲液,放
置于
98
℃水浴中加热变性。上样后用
12%
十二烷基硫酸钠
-
聚丙烯酰胺凝胶电泳,之后用聚
偏氟乙烯膜低温电转,用胎牛血清蛋白室温封闭后分别加入
GPX4
、β
-tubulin
一抗后放置于
摇床,室温孵育
3h
。洗膜
3
次后加入辣根过氧化物酶标记的对应二抗室温孵育
1h
,洗膜后
使用化学发光法显影。
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