构建小鼠精原细胞氧化应激模型
更新日期:2022-04-03     浏览次数:134
核心提示:6.蛋白质印迹法实验:裂解细胞后,1200 r/min,离心半径 20cm,离心 5 min 取上清提取各组细胞蛋白,依据 BCA 测量的蛋白浓度结果调整各组蛋白浓度后

6.蛋白质印迹法实验:裂解细胞后,1200 r/min,离心半径 20cm,离心 5 min 取上清提
取各组细胞蛋白,依据 BCA 测量的蛋白浓度结果调整各组蛋白浓度后添加上样缓冲液,放
置于 98℃水浴中加热变性。上样后用 12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,之后用聚
偏氟乙烯膜低温电转,用胎牛血清蛋白室温封闭后分别加入 GPX4、β-tubulin 一抗后放置于
摇床,室温孵育 3h。洗膜 3 次后加入辣根过氧化物酶标记的对应二抗室温孵育 1h,洗膜后
使用化学发光法显影。