将按照上述方法获得的滋养细胞充分接种在96孔培养板,1×104 个/ 孔,
(即每孔200μl),在细胞充分粘附贴壁后,按照实验设计,1.6μg/ ml为最高浓
度,根据钙卫蛋白倍比稀释法,依次加入每孔中,最低浓度为0.0125ng/ml,总
计18个浓度,每个浓度设置3个复孔,培养24h和48h后,分别加入5g/L的MTT
20μl,在37℃孵育4h后,吸弃上清液,每孔加入DMSO(二甲基亚砜)150μl,
5min振荡,使结晶完全溶解,用酶联免疫检测仪检测吸光度A492nm值。取3个
独立实验平均值,绘制以质量浓度为x轴,吸光度值为y轴的曲线。