地区人群他汀类药物个体化服用
更新日期:2022-04-06     浏览次数:125
核心提示:1.3.1 DNA提取及扩增 采集空腹受试者外周静脉血至EDTA抗凝管中,并将其保存在-80℃备用。按试剂盒说明书操作,在2小时内提取基因组DNA,并将其稀释后

1.3.1 DNA提取及扩增 采集空腹受试者外周静脉血至EDTA抗凝管中,并将其保存在-80℃备用。按试剂盒说明书操作,在2小时内提取基因组DNA,并将其稀释后进行PCR扩增。分别取ApoE2反应液、ApoE4反应液、SLCO1B1*1b反应液、SLCO1B1*5反应液置于反应管中;然后在装有4种反应液的反应管内加入待测样本DNA提取液、阳性对照、空白对照。将待测液进行扩增,扩增条件:UNG处理 37℃ 10min 1个循环;预变性 95℃ 5 min,1个循环;PCR 95℃ 15s,60℃ 60s,40个循环。完成后收集荧光信号。

1.3.3 相关基因型PCR结果判定 根据扩增曲线判读基因型。纯合野生:FAM通道Ct值<38,VIC通道无Ct值或Ct值≥38;杂合突变:FAM通道Ct值<38,VIC通道Ct值<38;纯合突变:FAM通道无Ct值,或Ct值≥38,VIC通道Ct值<38。