用传统方法培养分纯细菌
更新日期:2022-04-07     浏览次数:150
核心提示:2.2.1菌株鉴定及药敏 参照CLSI 2019标准[5],用传统方法培养分纯细菌,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定菌株,采用法国VITEK-2型全自

2.2.1  菌株鉴定及药敏  参照CLSI 2019标准[5],用传统方法培养分纯细菌,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定菌株,采用法国VITEK-2型全自动分析仪联合K-B纸片法分析菌株药物敏感性。

2.2.3  菌株分群及荚膜血清型检测  煮沸法提取菌株DNA并暂存于-20℃冰箱。聚合酶链反应(PCR)扩增ropB和Wzi基因。反应体系为30 μL:2×Premix Taq 15 μL,上下游引物各1 μL,模板DNA1 μL,ddH2O 12 μL。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测特异性并将特异性扩增产物送上海生工测序。rpoB测序结果提交BLAST-N获取菌株分群,Wzi测序结果提交https://bigsdb.pasteur.fr/cgibin/bigsdb/bigsdb.pl? db=pubmlst_ klebsiella_seqdef&page=sequence -Query获取菌株荚膜血清型。引物及扩增条件详见https://bigsdb.pasteur.fr/klebsiella/primers_used.html。

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