2.2.3 菌株分群及荚膜血清型检测 煮沸法提取菌株DNA并暂存于-20℃冰箱。聚合酶链反应(PCR)扩增ropB和Wzi基因。反应体系为30 μL:2×Premix Taq 15 μL,上下游引物各1 μL,模板DNA1 μL,ddH2O 12 μL。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测特异性并将特异性扩增产物送上海生工测序。rpoB测序结果提交BLAST-N获取菌株分群,Wzi测序结果提交https://bigsdb.pasteur.fr/cgibin/bigsdb/bigsdb.pl? db=pubmlst_ klebsiella_seqdef&page=sequence -Query获取菌株荚膜血清型。引物及扩增条件详见https://bigsdb.pasteur.fr/klebsiella/primers_used.html。