1.2 样本处理及检测方法:
样本处理:
样本从手术切除到样本处理时间不超过24h,实验操作中,制备乳腺肿瘤组织淋巴单细胞悬液是流式细胞术测组织中的淋巴细胞的前提。本实验是将乳腺肿瘤组织在无菌器皿中剪碎,再使用6-8ml0.2% Ⅳ型胶原酶消化,消化过程在37度水浴箱中以50转/ min的转速轻摇2-3h效果较好,消化时间根据组织大小决定,组织块剪的越小,消化时间越短,消化后1500转/ min离心10min,去上清液,加入细胞稀释液混匀经 70 µm细胞滤网过滤,细胞混悬液制备完成。
检测方法:
流式细胞检测使用美国BD公司的仪器和试剂,根据试剂说明书加入流式细胞检测抗体进行细胞染色,孵育后,上机检测乳腺癌组织中淋巴细胞的比例。