产生荧光信号实现Pb2+的定量检测
更新日期:2022-04-09     浏览次数:191
核心提示:1.2.4凝胶电泳尿素变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea-PAGE):17%凝胶制备液包含30%的丙烯酰胺/甲双叉丙烯酰胺凝胶液 6.8 mL、10TBE 1.2 mL、尿素 5.04 g

1.2.4 凝胶电泳

尿素变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea-PAGE):17%凝胶制备液包含30%的丙烯酰胺/甲双叉丙烯酰胺凝胶液 6.8 mL、10×TBE 1.2 mL、尿素 5.04 g、TEMED 8 µL、10%的APS溶液100 µL,将上述试剂混匀后用超纯水定容至12 mL,快速注入胶板,插入样品梳直至成型。取10 µL扩增后的样品加入 2 µL 上样缓冲液混匀,用微量进样针进样。然后,在 90 V下电泳30 min后140 V进行电泳2 h结束。

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE):8%丙烯酰胺/甲双叉丙烯酰胺凝胶液包含30%的凝胶储备液2.7 mL、10×TAE 1 mL、6.2 mL超纯水、TEMED 10 µL、10%的APS溶液 90 µL,除定容外其余操作同上,其不同在于:上样后用170V电泳5min,然后110 V电泳45 min结束。显影后用 ChemiDoc XRS凝胶成像采集PAGE结果。