1.4.3  体外瘤胃产气量试验

以厌氧保存后的沙棘枝干饲料为底物，参照Menke等^[15]的方法进行体外瘤胃发酵试验。每根玻璃培养管（100 ml）称入220 mg底物，并将注射器推桶前1/3部分均匀涂抹凡士林（保证气密性和润滑度），每个样品2根管，每个处理共6根管，称样完成后将所有培养管放置于39℃培养箱预热待用。然后，按照Menke和Steintain（1988）^[16]所用方法配制人工瘤胃缓冲液，晨饲前从3头体重约800 kg装有瘤胃瘘管的安格斯阉牛采集所需瘤胃液，四层纱布过滤后使用，瘤胃液与缓冲液按1：2比例混合而成人工瘤胃培养液。用分液器向每根培养管中注入30 ml人工瘤胃培养液，排出管内空气，记录初始刻度（0 h），置于39℃水浴摇床中培养，转速60 rpm/min，定时读取2、4、6、8、12、16、20、24、30、36、42、48、60、72 h培养管的刻度值（ml）。发酵结束时（72 h），收集发酵液，测定pH值（PHS-3C，上海雷磁仪器有限公司），然后离心取上清液用于氨态氮测定（酚-次氯酸钠比色法）^[17]。瘘管牛日粮配方：玉米（28%）、豆粕（8%）、枣粉（5%）全株玉米青贮（35%）、玉米秸秆（20%）、预混料（4%），每天饲喂2次（7:30和16:00），自由饮水。