1.3 膜隔离法

膜隔离法的原理是使用无菌半透膜将需要的细胞限制在固定空间内，该半透膜可选择性地允许基质和产物通过半透膜，酵母细胞不允许通过^[16]。膜隔离法的最大的优点是操作方便，这种膜通过孔径大小来提高物质通过的选择性，且能合理控制选择底物以及产物的扩散过程^[6]。缺点是半透膜容易发生堵塞，传质容易受限，生产成本较高，因此该方法在燃料乙醇生产中应用较少。

1.4 交联法

交联法的原理是通过双官能团或多官能团的交联剂与酵母细胞的表面基团进行反应，使细胞相互连接形成网状结构以达到将酵母细胞固定化的目的。交联法不需要载体，可以得到较高的细胞浓度。由于交联法是通过化学反应形成的化学键进行连接，固定化酵母细胞间结合力高，环境耐受程度较高，可承受温度、pH值的剧烈变化^[16]。然而，由于交联反应过程当中过于剧烈，会使得酵母细胞活性降低、无法再生，而且固化细胞机械强度较低。因此该方法在实际生产中应用较少，常与其他固定化方法结合使用^[17]。