1.2标本采集   采集标本前可对采集用具进行消毒，避免污染造成假阳性同时减少患者因取材引起的皮肤感染。对涂有药物的取材部位应先用清水清洗待自然晾干后再取材。对于体股癣应取红色病变部位与正常皮肤相交且有较多鳞屑处，手足癣应取潮湿的白色部位且有较多皮屑处，对于头癣应选取头皮有鳞屑、脓液或有脱发断发处的鳞屑或脓液，另外还应用镊子拔取根部已松动的断发。

1.3制片  每例患者于同一病患处采集样本，平均分成两份分别置于载玻片上，一份滴改良KOH溶液（称取KOH15g加入30ml蒸馏水中溶解后再依次加入DMSO(二甲基亚砜)40ml，甘油(丙三醇)20ml摇匀后加入蒸馏水至100ml混匀，）^[3]，一份滴荧光染色试剂（重庆赋新生物医药有限公司，主要成分：1%荧光增白剂、2%伊文思蓝、10%KOH、90%纯化水），盖上盖玻片。从盖上盖玻片时开始计时，记录每份标本制片时间。

1.4镜检  将每份标本分别置于普通光学显微镜和荧光显微镜下检查，分别记录二者的阅片时间、阳性率及镜下菌丝或孢子的清晰程度。将每份阳性样本编号保存，分别观察并记录其1小时、3小时、5小时的菌丝形态保持情况。