1.4.3  初筛阳性样本的复核  hisJ和invA为沙门菌的两个保守基因^[6,7]，根据GenBank中的基因序列，设计引物探针（见表1），对初筛沙门菌阳性的样本核酸进行复核。反应体系为25µl，包括2×PCR反应预混液12.5µl，上下游引物和探针各0.5µl，提取的DNA模板2µl，去离子水9µl。反应条件为95℃ 10min，95℃ 15s，60℃ 1min，40次循环，反应结束后读取结果。

1.5  阳性样本的分离培养  将核酸检测沙门菌阳性的样本，接种于沙门显色和选择性培养基，置于37℃培养18~24小时，然后选取可疑菌落进行血清鉴定。同时，将复核阳性的样本取1ml处理后液体，加入到10ml 1×SC增菌液中，置于37℃培养8小时，进行第二次增菌培养，增菌完成后提取核酸，用沙门菌实时荧光PCR方法进行检测，并将二次增菌液也接种于沙门显色和选择性培养基中进行分离培养鉴定，提高沙门菌的分离成功率。