INHBB基因对应的氨基酸序列排列图用BioXM2.6软件获得。分析INHBB蛋白的氨基酸序列使用EXPASY在线网站进行。通过NCBI的BLAST分析犏牛与其它9个物种INHBB核苷酸序列同源性，并利用MEGA软件得出10个物种的INHBB核苷酸系统进化树。其他分析软件参考李鹏程等文献[18]。

1.5 实时荧光定量 PCR    

荧光定量操作步骤按照生工生物工程股份有限公司的 2×SG Fast qPCR Master Mix试剂盒的说明书进行，检测INHBB基因在犏牛附睾三个不同组织区段的差异表达。PCR反应体系10 μL：2×SG Fast qPCR Master Mix 5 μL，混匀的上下游引物（IF2、IR2）0.8 μL，无菌去离子水3.1 μL，cDNA 0.5 μL，ddH2O 0.6 μL。反应程序：94 ℃ 预变性2 min，95 ℃ 变性30S，55 ℃ 退火30 S，72 ℃ 延伸30 S，重复30次，72 ℃延伸2 min。