8名受试者在试验前一天清淡晚餐后禁食，试验早晨空腹口服苯磺酸氨氯地平5mg。分别于给药前（0h）和给药后1、2、4、8、24、48、72h，取2ml血液于含肝素的玻璃管中，3500r·min^-1离心15min，分离的血浆在-80℃冻存直至分析。

4.2 储备液和标准工作溶液的制备

分别用甲醇制备苯磺酸氨氯地平(200μg·mL^-1)和尼莫地平(200μg·mL^-1)储备溶液。苯磺酸氨氯地平储备液用甲醇稀释成32、16、8、4、2、1、0.5、0.2μg·mL^-1系列标准工作溶液。尼莫地平储备液用甲醇稀释成2ng·mL^-1的工作溶液。所有储备液和工作液保存在-80℃冰箱。

4.3 样品制备、提取和质量控制 (QC) 样品

 将受试者血浆或加标准品的空白血浆200 μL、 内标溶液200 μL和甲醇200 μL涡旋混合10s，3500 r·min^-1离心5min。将第一次离心的上清液转移至新离心管中，用甲醇200 μL复溶沉淀，3500 r·min^-1 离心5 min，合并两次所得上清液，将水浴锅温控调至40℃档位，氮气吹干溶剂。残渣用甲醇200 μL复溶，涡旋 1min，6000 r·min^-1 离心 10 min，转移至进样瓶中，取5 μL进样分析。以相同方式制备三个水平的质量控制 (QC) 样品（低浓度：0.5 ng·mL^-1；中浓度：4 ng·mL^-1；高浓度：30ng·mL^-1）。