选择干净完整的新鲜柚子,清洗除杂后剥皮,去掉内层柚棉,取黄色果皮切成 1 cm 块状,用纸巾吸干水分,置于干燥箱内,60 ℃ 烘干。用粉碎机将小块柚子皮粉碎成末,过筛后密封保存备用。
1.3.2芦丁标准曲线的绘制
采用 NaNO2-Al(NO3)3-NaOH 显色法绘制芦丁标准曲线[19],原理是黄酮类化合物在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下,可与 Al3+ 生成络合物,加入氢氧化钠碱水溶液后呈橙红色,在特定波长处有吸收峰且符合定量分析的朗伯比尔定律。称取 50.0 mg 芦丁标准品,用 60 % 乙醇溶液充分溶解后定容至 100 mL,配制成 0.5 mg/mL 的芦丁储备溶液待用。
将芦丁标准品稀释,以 60 % 乙醇溶液为对照,参照文献[20]方法进行显色反应,简述如下,向待测溶液中依次加入 5 % 亚硝酸钠溶液 1.0 mL,10 % 硝酸铝溶液 1.5 mL,和 4.0 mL 氢氧化钠碱水溶液,最后用 60 % 乙醇溶液定容至 25 mL,混匀后静置 15 min。用紫外分光光度计在波长 200 nm~600 nm 范围内进行扫描,结果显示标准品在 510 nm 处有最大吸收,故确定 510 nm 为检测波长。