核心提示:将鉴定为阳性病料的总DNA使用高保真酶扩增全基因组。PCR程序同上。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果确认片段大小后与pMD-19T载体的连接后转化为DH5大
将鉴定为阳性病料的总DNA使用高保真酶扩增全基因组。PCR程序同上。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果确认片段大小后与pMD-19T载体的连接后转化为DH5α大肠杆菌感受态细胞,挑取阳性单克隆后样品送至上海生工有限公司测序。为避免测序错误,至少对3个独立阳性克隆进行了测序。使用DNASTAR 7.1.0.44和SnapGene 4.3.6 对测序结果进行拼接[9]。