丙酸生成前体及多不饱和脂肪酸对红花油中亚油酸代谢生成甲烷及CLA的影响
摘 要:本文旨在研究富马酸及多不饱和脂肪酸(PMUF)(C20:5,C22:6)在瘤胃微生物的作用下对富含亚油酸(Linoleic acid, C18:2)的红花油 (safflower oil) 调控脂肪酸的代谢过程中对甲烷的合成效率及其代谢机制的影响,试验分为五个处理:对照组(Control, 90ml培养液:45ml瘤胃液+45ml人工唾液);SO (Control+红花油120mg);SO-FO(SO + 24mg鱼油);SO-FA(SO+24mM富马酸);SO-FO-FA(SO+24 mg鱼油+24mM富马酸)。实验结果显示:经过3h培养后,与对照组、SO、SO-FO处理相比,SO-FA 和SO-FO-FA处理都显著提高了培养液的pH值(P<0.0001)和丙酸摩尔浓度(P<0.001~P<0.0001),但降低了丁酸的摩尔浓度(P<0.004 - 0.001)。与对照组相比,其它四个处理均显著提高了发酵气体产生总量(P<0.0001)。其中,SO-FA 和SO-FA-FO产生的发酵气体都显著高于SO和SO-FO。经过12h的培养,SO,SO-FO,SO-FA,SO-FO-FA都显著降低了甲烷气体总产量(P<0.007),其中SO-FO-FA处理产生的甲烷总量最低。同时,与对照组相比,SO,SO-FO,SO-FA,SO-FO-FA的甲烷合成菌特异引物的mRNA表达量在培养6h时显著降低(P<0.01);其中,SO-FO,SO-FA,SO-FO-FA的mRNA表达量显著低于SO处理。在培养过程中,富马酸及多不饱和脂肪酸影响了红花油脂肪酸生物氢化进程:与SO相比,SO-FO,SO-FA,SO-FO-FA提高了总CLA(cis9, trans11-CLA与trans10, cis12-CLA)的浓度(P<0.003~P<0.0001)、cis9, trans11-CLA浓度 (P<0.008~P<0.001) 和 trans10, cis12-CLA 浓度 (P<0.013~P<0.001);比较而言,SO-FO-FA影响生物氢化进程效果最显著,使总CLA(cis9, trans11-CLA与trans10, cis12-CLA)的浓度、cis9, trans11-CLA浓度和trans10, cis12-CLA 浓度达到最高。另外,添加的富马酸浓度在培养3h内迅速降低;SO-FA,FO-FO-FA处理经过3h培养后,在发酵过程中产生的乳酸浓度迅速降低,差异显著(P<0.01~P<0.001)。结论:丙酸生成前体(富马酸)和PMUF不影响瘤胃微生物的发酵作用。PMUF中有多个不饱和双键,而双键的氧化饱和作用又影响了亚油酸的生物氢化作用,从而提高了CLA的生成效率,也降低了甲烷的产量及甲烷生成菌的mRNA表达量。富马酸和PMUF的协同作用,加快代谢过程中氢的转移,使得CLA的生成量达到最高,甲烷的产量降到最低。
关键词: 瘤胃, 微生物, 甲烷, 共轭亚油酸, 共轭亚麻酸, 丙酸前体