沉默RORα促进人胃癌细胞Wnt/β-catenin通路靶基因表达

 [摘 要] 目的：研究沉默RORα对人胃癌细胞Wnt/β-catenin通路靶基因的作用。方法：MTT检测MGC803细胞增殖。RT-PCR、Western blot、免疫共沉淀与免疫荧光检测Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。荧光素酶报告检测c-Myc基因启动子活性。结果：MTT显示，RORα沉默细胞的增殖能力较对照组与空载体组明显减弱 (P<0.05)。RT-PCR 与Western blot显示，RORα沉默组Wnt1 mRNA与蛋白表达较对照组与空载体组上调 (P<0.05)，而β-catenin mRNA与蛋白表达无差异(P>0.05)。免疫共沉淀显示，RORα沉默组RORα与β-catenin结合较对照组与空载体组明显减少 (P<0.05)。双标免疫荧光证明，沉默组RORα与β-catenin结合较对照组与空载体组明显减少。并且，沉默RORα可显著上调核内β-catenin与p-β-catenin表达 (P<0.05)，同时，TCF-4蛋白表达显著上调 (P<0.05)。RORα沉默较对照组与空载体组Wnt/β-catenin通路靶基因Axin、c-Myc、c-Jun和MMP-9表达显著上调 (P<0.05)。荧光素酶报告显示，RORα沉默较对照组与空载体组c-Myc启动子活性明显增加 (P<0.05)。结论：沉默RORα可通过削弱Wnt/β-catenin通路促进相关靶基因表达和人胃癌细胞增殖。

[关键词] RORα；沉默；人胃癌MGC803细胞；增殖；Wnt/β-catenin通路；靶基因