娃儿藤碱类化合物NK007对三阴乳腺癌细胞系作用及其机制研究

 

摘要

目的：研究娃儿藤碱类化合物NK007 抑制人三阴乳腺癌细胞增殖，并探讨其作用机制，娃儿藤碱类化合物NK007良好的抗肿瘤活性为临床上开发治疗三阴乳腺癌提供实验依据。方法： CCK8法检测NK007对人乳腺癌细胞MD231与MCF7与SKBR3与T47D的细胞活力抑制作用且对正常细胞—人胚肺成纤维细胞MRC-5显示较低细胞毒性;CFSE染料法检测NK007对人三阴乳腺癌细胞系（MD231）细胞增殖影响及对单阴乳腺癌细胞（MCF7）增殖影响;Annexin V-FITC/PI双染色法检测NK007对MD231细胞及MCF7细胞凋亡水平的影响;PI染色法检测不同浓度NK007对MCF7周期影响;划痕实验检测不同浓度NK007对人三阴乳腺癌细胞系及单阴乳腺癌细胞迁移能力的影响。检测不同浓度顺铂与NK007联合作用于MD231细胞的增殖情况及阿霉素与NK007联合作用于MCF7细胞增殖影响。实时荧光定量PCR（qPCR）检测细胞周期相关基因的表达水平。结果： NK007可以明显抑制MD231细胞及MCF7细胞增殖；且随着药物浓度增加， MD231的总凋亡水平显著增加及诱导MCF7细胞发生G1/G0期阻滞;不同浓度NK007显著抑制人三阴乳腺癌细胞MD231和单阴乳腺癌细胞MCF7细胞迁移；48h时不同浓度顺铂与多浓度NK007联合用药作用人乳腺癌细胞MD231是相加作用；从mRNA水平检测到不同浓度NK007诱导三阴及单阴乳腺癌细胞周期阻滞。结论：娃儿藤碱类化合物NK007能够有效抑制多种人类肿瘤细胞生长，尤其是乳腺癌细胞系而对正常的细胞MRC-5毒性较小。同时NK007能显著抑制人三阴乳腺癌细胞系迁移。通过娃儿藤碱类化合物NK007和顺铂联合用药，发现有效抑制三阴乳腺癌增殖并引起细胞凋亡，为临床上开发三阴乳腺癌抗肿瘤药物提供实验依据。

关键词：娃儿藤碱类；增殖；凋亡；细胞周期；迁移；联合用药