对虾白斑综合征病毒和传染性皮下及造血器官坏死病毒双重LAMP检测方法建立与临床应用分析

摘 要：环介导等温扩增法(LAMP)针对靶基因的6 个区域设计4 对特异引物，可以在恒温条件下，将只有几个拷贝的靶核酸扩增到级数水平。本研究对对虾白斑综合征病毒和传染性皮下及造血器官坏死病毒建立双重LAMP检测方法，以钙黄绿素荧光目测方法和电泳方法分别来观察结果，通过序列分析发现WSSV的LAMP扩增靶序列中存在Hinf Ⅰ酶切位点，应用内切酶切反应来区分两种病毒的扩增产物。实验结果显示所建立双重LAMP方法具有较好灵敏性和特异性，不需要严格的仪器设备、操作更简单，适用于条件相对落后的基层实验室进行快速检测。

关键词：对虾白斑综合征病毒；传染性皮下及造血器官坏死病毒；环介导等温扩增法（LAMP）；双重LAMP