数字PCR 定量检测牛源性成分方法比较

 

摘要：近年，肉制品掺杂掺假情况频繁发生，主要掺假方式是在高价肉制品中掺入廉价的肉类原料，并在商品标签中不注明成分，严重损害消费者合法权益。目前市场上牛肉掺假情况较为常见，为准确定量肉及肉制品中牛源性成分的含量，以牛羊、单拷贝基因生长激素基因（GH）为扩增靶基因设计合成牛源的引物、探针，制备质粒以构建标准曲线，通过方程算出各自的拷贝数，根据拷贝数的比值计算样品中牛肉源成分与恒定羊源性成分的比值，建立数字PCR 检测体系，对比绝对定量与内标法定量检测牛源性成分的准确性。结果显示，建立数字PCR定量方法具有良好的特异性和灵敏度，检测牛源性成分最低检测限0.21 copies/μL。对已知目标肉含量的混合肉样进行定量检测，结果显示，最低定量检测范围1%-95%，且不受外源物种的干扰。通过对市售样品的检测，能够准确检测出不同样品中牛肉的含量，并发现存在掺假现象。本试验建立的数字PCR方法在肉制品定量检测方面具有较大的应用潜力，为肉制品质量控制提供有效的技术手段。
 

关键词:数字PCR；牛源性成分；肉制品；掺假