株犬源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

 

摘  要：为检测北京市某动物医院宠物犬腹泻的病原及其耐药情况，试验采用细菌分离与形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列分析、大肠杆菌荧光PCR致泻型检测等方法对宠物犬腹泻病原进行鉴定，并采用K-B药敏纸片法及耐药基因PCR检测测定其耐药情况。结果表明：从无菌采集的肛门拭子中分离到1株病原菌，命名为37-Canine株，该病原菌为两端钝圆，多呈单个存在，短小杆状的革兰氏阴性菌，通过生化试验鉴定为大肠杆菌；经PCR电泳试验，16S rDNA测序分析，与Genbank中大肠杆菌参考株16S rDNA基因序列的同源性达到99%，进化树显示与AP018488.1参考株被划为一支；经大肠杆菌致泻型荧光PCR检测为EIEC-EPEC-EHEC的杂合型菌株，具有致泻性；37-Canine株对临床常用药物头孢曲松钠、头孢噻肟、诺氟沙星3种药物敏感，对多粘菌素B、庆大霉素2种药物中度敏感，对阿莫西林、磺胺嘧啶、氨苄西林3种药物耐药；经过耐药基因PCR检测显示37-Canine株不携带喹诺酮类耐药基因，携带氨基糖苷类、四环素类、氯霉素类耐药基因，出现多重耐药。本试验为临床腹泻病例合理使用抗生素及宠物犬大肠杆菌的防治提供了参考依据。

关键词：宠物犬；大肠杆菌；分离鉴定；16S rDNA；耐药性