一株鸭 3 型腺病毒分离鉴定及其 Fiber-2 基因的克隆表达

摘要：该研究首先从一例疑似腺病毒感染的鸭肝组织中，通过接种 LMH 鸡肝细胞以及 PCR 鉴定，分离到一株鸭 3 型腺病毒，命名为 GDMJW2019。随即对 GDMJW2019 毒株的纤突 蛋白 Fiber-2 基因进行了原核及真核表达载体构建，重组子分别命名为 pCold-I-F2 以及 pcDNA3.1-F2。经 IPTG 诱导，SDS-PAGE 以及 Western Blot 分析发现 pCold-I-F2 原核表达 载体可高效表达 Fiber-2 融合蛋白。利用纯化 Fiber-2 融合蛋白免疫小鼠获得了抗 Fiber-2 融 合蛋白的小鼠多克隆抗体。间接免疫荧光试验证明，制备的抗 Fiber-2 融合蛋白的小鼠多克 隆抗体不仅能与转染真核表达载体 pcDNA3.1-F2 的 LMH 细胞反应特异性反应，而且能特异 性识别感染 GDMJW2019 的 LMH 细胞。以上鸭 3 型腺病毒 GDMJW2019 的分离鉴定、Fiber-2 蛋白克隆表达及其小鼠多抗的研制对进一步探究鸭 3 型腺病毒发病机制，研制特异性诊断及 免疫防控技术打下了基础。

关键词：鸭 3 型腺病毒；分离；Fiber-2 表达；小鼠多克隆抗体